Protein-A/G纯化柱

使用说明书

仅供体外研究使用，不用于临床诊断!

第1版（2016年04月修订）

关联信息

蛋白A（Staphylococcal Protein A）是一种金黄色葡萄球菌细胞壁蛋白质，能与哺乳动物IgG的Fc区结合。采用重组表达的Protein A，将Protein A与溴化氢活化的颗粒状琼脂糖凝胶偶联制成Protein A预装柱，能够特异性地结合多种免疫球蛋白的Fc区段。
  Protein A预装柱可用来纯化不同来源的抗体及不同亚型的抗体，并在免疫共沉淀实验中捕获免疫复合物。本产品使用了多位点交联技术，稳定性好、特异性高并具有广谱结合力，每毫升基质可特异性结合5-10毫克抗体。

产品组分

名称	规格
Protein A预装柱	5ml
产品说明书	1份

保存条件

经常使用4℃保存，长期保存加甘油放置于-20℃，有效期一年。

运输条件

低温冷藏运输

注意事项

抗体纯化柱可以多次反复使用，但应当避免同一支纯化柱纯化不同的抗体，因为抗体和柱子之间结合紧密，酸洗脱并不能完全洗去结合上的免疫球蛋白，将产生交叉反应。

操作步骤

1、取Protein A柱平衡至室温，用 10倍柱体积的PBS洗涤平衡层析柱；
  2、含抗体的血清或其它体液高速离心后，将上清与等体积2×PBS缓冲液混合，调整pH以及离子浓度后，缓慢加入层析柱；
  3、用10倍柱体积以上的PBS洗涤，至流出液无蛋白检出；  
  4、加入2-5倍柱体积0.1 M柠檬酸（pH 2.7）或者0.1 M甘氨酸（pH 3.0），收集洗脱液；
  5、洗脱后的抗体加入饱和Na2HPO4溶液进行中和；
  6、浓缩洗脱液到所需体积，加入50%甘油-20℃保存；  
  7、层析柱中Protein
A柱使用后需要及时处理，酸洗脱抗体以后，使用10倍柱体积PBS洗柱平衡到中性，20%乙醇溶液充分洗涤后，封闭上下两端，保存在4℃。