磷酸化抗体定制服务
使用说明书
仅供体外研究使用，不用于临床诊断!
第1版（2016年04月修订）
关联信息
翻译后修饰是调节蛋白质功能的重要方式，参与和调节许多关键的生命活动过程。蛋白质磷酸化是重要的翻译后修饰方式，它与信号传导，细胞周期，生长发育以及癌症机理等诸多生物学问题存在密切关系。武汉云克隆提供磷酸化多克隆及单克隆抗体定制服务，我们提供从抗原设计到抗体的一站式服务，快捷便利。云克隆在抗体生产和研发方面，开发出了比传统弗氏佐剂免疫效果强2-3倍的高效高分子佐剂并搭配Easy-fusion高效融合技术，使得我们通过亲和纯化得到的磷酸化特异性抗体在检测样本中目的蛋白磷酸化方面具有高灵敏度。
技术流程
磷酸化抗体定制服务大体技术流程如下：
类型1：磷酸化和非磷酸化多肽合成-->初次免疫-->再次免疫-->抗血清收集-->抗原亲和纯化-->抗体筛选-->检测
类型2：磷酸化和非磷酸化多肽合成-->免疫动物-->细胞融合-->细胞筛选-->腹水制备-->抗体纯化-->检测
定制服务信息
| 类型 | 客户提供 | 主要步骤 | 特点 | 交付内容 | 交付时间 |
| 1型（磷酸化多克隆抗体制备） | 蛋白信息 | 1. 多肽设计； 2. 磷酸化与非磷酸化，两条多肽合成； 3. 多肽偶联； 4. 实验动物体检，抽取免疫前血清保存； 5. 抗原初次免疫； 6. 取血，血清ELISA检测； 7. 第二次免疫； 8. 取血，血清ELISA检测； 9. 第三次免疫； 10. 取血，血清ELISA检测； 11. 第四次免疫； 12. 取血，血清ELISA检测，保存； 13. 亲和纯化和抗体筛选； 14. 抗体与磷酸化多肽和非磷酸化多肽反应交叉性验证。 | 1. 免疫前取血，四次免疫，多次取血检测。 2. 初次免疫可以选择弗氏完全佐剂或公司研发的高效大分子完全佐剂（可选）。 3. 加强免疫可以选择弗氏不完全佐剂或公司研发的高效大分子不完全佐剂（可选）。 4. 亲和纯化。 5. 纯化抗体ELISA 效价 ≥1:64,000，与非磷酸化多肽的交叉反应<10%。 | 1. 免疫前分别取血清1-2ml。 2. 血清ELISA检测报告。 3. 1-10mg纯化抗体。 4. 抗体检测报告。 剩余多肽。 5. 多肽合成和修饰报告。 | 10-20周 |
| 2型（磷酸化单克隆抗体制备） | 蛋白信息 | 1. 多肽设计； 2. 磷酸化与非磷酸化，两条多肽合成； 3. 多肽偶联； 4. 实验动物体检，抽取免疫前血清保存； 5. 免疫动物（大鼠和小鼠选择）； 6. 细胞融合； 7. 杂交瘤细胞筛选； 8. 腹水制备； 9. 抗体纯化； 10. 抗体与磷酸化多肽和非磷酸化多肽反应交叉性验证。 | 1. 公司提供多种偶联载体。 2. 公司特有的纳米乳化技术，以及高效高分子佐剂，提高动物免疫效果。 3. 提供5只Balb/c小鼠或3只大鼠。 4. Easy-fusion高效融合技术，操作快捷，融合效率和成功率高。 5. 多种抗体纯化方式可供选择。 6. 纯化抗体ELISA 效价 ≥1:64,000，与非磷酸化多肽的交叉反应<10%。 | 1. 1-3个杂交瘤细胞。 2. ≥1mg抗体（选择一株杂交瘤细胞生产）。 3. ELISA检测报告。 4. 抗体质检报告。 5. 剩余多肽和偶联多肽。 6. 多肽合成和修饰报告。 | 20-25周 |
