长臂生物素标记试剂盒

使用说明书

仅供体外研究使用，不用于临床诊断!

第1版（2016年04月修订）

关联信息

生物素和亲和素系统作为最为常见的的信号放大系统，在生化检测中被广泛使用。为解决由于空间位阻效应产生的生物素和亲和素难以结合和结合效率低等问题，武汉云克隆研发了带有NH2-长臂的生物素标记试剂盒，一方面它保留了原有生物素特性，另一方面它减小了空间位阻，使生物素和亲和素的结合效率更高。

试剂盒包含过滤管和相关的试剂，满足6次0.1-1mg 的蛋白或抗体的标记，标记过程不需透析，操作简便。

试剂盒组分

组分	规格
试剂A	30 ml
试剂B	1 ml
试剂C	100ul
NH2-长臂生物素	6管
过滤管	2ml*6管
说明书	1储存及有效期

2-8℃，试剂盒质保期一年。

操作步骤

1、将待生物素化的蛋白质或抗体和试剂A按v:v=1~2共计2ml加入过滤管内管中，7500g离心10分钟，弃去外管内液体。利用试剂A补足2ml，7500g离心10分钟， 收集过滤管内管中液体。

2、用试剂A将样品浓缩液稀释到1mg/ml（如果浓缩液浓度过低需要进一步浓缩），再吸取1ml 稀释好的样本放入过滤管内管中。

3、向装有NH2-长臂生物素的EP管中加入150ul 的试剂B，使管内粉末充分溶解。 取120ul混合液加入到过滤管内管中，充分混匀。

4、室温持续震荡混匀3-4小时。

5、加入9.6ul的试剂C，室温持续震荡混匀10分钟。

6、7500g离心10分钟，弃去外管内液体，收集内管中的液体用于后续实验。

注意事项

1、过滤管允许分子量≤10KDa的分子通过，所以请注意被标记物的分子量。

2、本试剂盒还可以用于分子量适中，能与-NH2进行反应的其他物质。

3、当NH2-长臂生物素与活性蛋白的活性中心部位以及活性中心区域的氨基酸结合可能导致蛋白失活，对于此种蛋白请务必更换其他方式进行标记。

4、NH2-长臂生物素在溶解前请离心，防止粉末吸附在管壁和管盖上。

5、被标记物量比较少的情况下，为减少样本的损失，建议使用透析的方法。