细胞迁移实验服务
使用说明书
仅供体外研究使用,不用于临床诊断!
第1版(2016年04月修订)
【服务内容】
细胞迁移实验将待研究的细胞加入Transwell上室,下室加入高浓度FBS培养液,下室的培养液影响上室的细胞,使细胞透过聚碳酸酯膜,记录细胞的穿过聚碳酸脂膜的个数,实验过程中不同处理组的细胞透过膜的个数不同,其迁移能力不同,本实验的目的是考察细胞的迁移能力的强弱。
【项目和周期】
周期:1~2周
基本步骤:
(1)制备单细胞悬液:分别取转染后培养24小时的细胞,0.25%胰酶消化并收集细胞,1000rpm 离心5min,弃上清液,用无血清 DMEM 培养液重悬细胞,计数,调整细胞密度为
1×10e6 个/ml。
(2)接种细胞:将单细胞重悬液各取 200ul加入上室,下室中加入 600ul含 30%FBS 的 DMEM 培养液。种板时注意下层培养基和小室中的聚碳酸酯膜间不要有气泡产生,于37℃、5%CO2 细胞培养箱内培养72小时。
(3)固定、染色:取出小室,小心吸去上室的培养液,PBS缓冲液轻洗3次,用消毒湿棉签轻轻擦净上室未迁移细胞,95%酒精固定30min,结晶紫染色 10min,自来水冲洗3次以上,晾干。
(4)拍照、计数:20 倍光学显微镜下观察,计数每视野的侵袭细胞数,计算平均值。
【客户提供的材料】
1.待检测或处理的细胞;如果常见的人和大小鼠细胞系,公司可免费提供。
2.细胞处理的相关药物和实验方案;
【反馈给客户结果】
1、提供相应实验数据和图表;
2、提供具体的实验报告;
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