SDS-PAGE凝胶快速配制试剂盒

使用说明书

仅供体外研究使用，不用于临床诊断!

第1版（2016年04月修订）

[产品信息]

SDS-PAGE凝胶快速配制试剂盒提供了配制SDS-PAGE凝胶所需的各种试剂。配制方法简单且快速，方便客户开展SDS-PAGE实验。

[试剂组分]

名称	规格
SDS-PAGE下层胶预混液（浓度可选）	7.5 mL * 2
Tris8.8下层胶缓冲液	5 mL
5%SDS-PAGE上层胶预混液	8.7 mL
Tris6.8上层胶缓冲液	1.25 mL
10%过硫酸铵	0.3mL
产品说明书	1份

[下层胶浓度备选]

下层胶（分离胶）可按下表选用SDS-PAGE下层胶预混液，共5种常见浓度，包括6%、8%、10%、12%和15%。请根据目的蛋白的分子量确定SDS-PAGE下层胶预混液浓度。

编号	SDS-PAGE下层胶预混液	目的蛋白最佳分离范围
IS149-1	6% SDS-PAGE下层胶预混液	70-250kD
IS149-2	8% SDS-PAGE下层胶预混液	40-150kD
IS149-3	10% SDS-PAGE下层胶预混液	25-100kD
IS149-4	12% SDS-PAGE下层胶预混液	18-60kD
IS149-5	15% SDS-PAGE下层胶预混液	10-40kD

[储存及有效期]

试剂盒拆开保存，10%过硫酸铵溶液分装成小管-20℃避光保存，SDS-PAGE下层胶预混液和SDS-PAGE上层胶预混液4℃避光保存，其它试剂4℃保存。试剂盒质保期6个月。

 

[操作步骤]

1、以伯乐、六一的小型电泳槽为例；安装灌胶模具，依照模具说明书进行。

2、使用前将试剂盒中试剂缓慢均衡至室温（18-25℃），以加快凝胶凝聚速度。

3、按照下层胶(分离胶)体积配比参考表，选择配方配制所需体积的胶溶液。例如1mm厚的模具配制5mL分离胶溶

液，将胶溶液混匀之后加入模具中，然后在分离胶的上表面加2-4mm高的异丙醇或者纯水以封住胶面，保持胶面平整。

下层胶(分离胶)体积配比参考表

成分	5mL	10mL	15mL	20mL	30mL	50mL
**SDS-PAGE下层胶预混液	3.75mL	7.5mL	11.25mL	15mL	22.5mL	37.5mL
Tris 8.8下层胶缓冲液	1.25mL	2.5mL	3.75mL	5mL	7.5mL	12.5mL
10%过硫酸铵	0.05mL	0.1mL	0.15mL	0.2mL	0.3mL	0.5mL

4、室温放置20-40分钟后，可以看到一个分离界面，倾倒掉上层异丙醇或纯水。

5、按照上层胶(浓缩胶)体积配比参考表，配制2mL或3mL浓缩胶溶液，混匀之后加入模具，并插入与模具大小相同，与凝胶厚度相当的梳子，室温放置20-40分钟使凝胶凝聚。

上层胶(浓缩胶)体积配比参考表

4mL	5mL
5% SDS-PAGE上层胶预混液	1.75mL	2.6mL	3.5mL	4.35mL
Tris 6.8上层胶缓冲液	0.25mL	0.38mL	0.5mL	0.63mL
10%过硫酸铵	0.02mL	0.03mL	0.04mL	0.05mL

6、配制好的凝胶，如果当天暂不使用，可以保鲜膜封好，在4℃保存1-2天内使用。

 

[注意事项]

1、预混液中含有Acr-Bis，对人体有毒，且预混液中含有易燃易挥发且有腐蚀性的成分，操作时请特别小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。

2、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套、口罩操作。

3、说明书中推荐的凝胶凝聚时间受温度影响，室温25℃时，凝胶凝聚时间为20-40分钟。当室温低于20℃，建议放入恒温箱（37℃）。

4、请稍微倾斜插入梳子，以减少或避免气泡进入。

5、本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。