抗溶酶体关联膜蛋白2抗体(Anti-LAMP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
ELISA Kit for Anti-Lysosomal Associated Membrane Protein 2 Antibody (Anti-LAMP2)
CD107-B; CD107b; LAMP-2C; LAMPB; LGP96; Lysosome-associated membrane glycoprotein 2; CD107 antigen-like family member B
- 编号AEB464Hu
- 物种Homo sapiens (Human,人) 相同的名称,不同的物种。
- 实验方法间接法
- 反应时长2h, 30min
- 检测范围7.8-500pg/mL
- 灵敏度最小可检测剂量小于等于3.2pg/mL.
- 样本类型serum, plasma and other biological fluids
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- 规格 48T96T 96T*5 96T*10 96T*100
- 价格 ¥ 3780 ¥ 5400 ¥ 24300 ¥ 45900 ¥ 378000
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特异性
本试剂盒用于检测抗溶酶体关联膜蛋白2抗体(Anti-LAMP2),经检测与其它相似物质无明显交叉反应。
由于受到技术及样本来源的限制,不可能完成对所有相关或相似物质交叉反应检测,因此本试剂盒有可能与未经检测的其它物质有交叉反应。
回收率
分别于定值血清及血浆样本中加入一定量的抗溶酶体关联膜蛋白2抗体(Anti-LAMP2)(加标样品),重复测定并计算其均值,回收率为测定值与理论值的比率。
样本 | 回收率范围(%) | 平均回收率(%) |
serum(n=5) | 85-93 | 89 |
EDTA plasma(n=5) | 95-102 | 98 |
heparin plasma(n=5) | 88-104 | 98 |
精密度
精密度用样品测定值的变异系数CV表示。CV(%) = SD/mean×100
批内差:取同批次试剂盒对低、中、高值定值样本进行定量检测,每份样本连续测定20 次,分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。
批间差:选取3个不同批次的试剂盒分别对低、中、高值定值样本进行定量测定,每个样本使用同一试剂盒重复测定8次,分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。
批内差: CV<10%
批间差: CV<12%
线性
在定值血清及血浆样本内加入适量的抗溶酶体关联膜蛋白2抗体(Anti-LAMP2),并倍比稀释成1:2,1:4,1:8,1:16的待测样本,线性范围即为稀释后样本中抗溶酶体关联膜蛋白2抗体(Anti-LAMP2)含量的测定值与理论值的比率。
样本 | 1:2 | 1:4 | 1:8 | 1:16 |
serum(n=5) | 78-97% | 94-101% | 98-105% | 95-103% |
EDTA plasma(n=5) | 90-98% | 92-101% | 96-105% | 98-105% |
heparin plasma(n=5) | 96-103% | 83-101% | 81-99% | 84-91% |
稳定性
经测定,试剂盒在有效期内按推荐温度保存,其活性降低率小于5%。
为减小外部因素对试剂盒破坏前后检测值的影响,实验室的环境条件需尽量保持一致,尤其是实验室内温度、湿度及温育条件。其次由同一实验员来进行操作可减少人为误差。
实验流程
1. 实验前标准品、试剂及样本的准备;
2. 加样(标准品及样本)100µL,37°C孵育1小时;
3. 吸弃,加检测溶液A100μL,37°C孵育1小时;
4. 洗板5次;
5. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分钟;
6. 加终止液50µL,立即450nm读数。
实验原理
将抗原包被于96孔微孔板中,制成固相载体,向微孔中分别加入标准品或标本,其中的抗溶酶体关联膜蛋白2抗体(Anti-LAMP2)与连接于固相载体上的抗原结合,然后加入HRP标记的二抗,彻底洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的抗溶酶体关联膜蛋白2抗体(Anti-LAMP2)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(O.D.值),计算样品浓度。
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参考文献
杂志 | 参考文献 |
Frontiers in Aging Neuroscience | Cerebrospinal fluid concentration of key autophagy protein lamp2 changes little during normal aging [Pubmed:29867441] |
Brain Research | CSF lamp2 concentrations are decreased in female Parkinson's disease patients with LRRK2 mutations [Pubmed:29456132] |
Cytokine | Impaired HVJ-stimulated Interferon producing capacity in MPO-ANCA-associated vasculitis with rapidly progressive glomerulonephritis lead to susceptibility to … [Pubmed: 32828064] |
International Journal of Hypertension | The Association of Serum Anti-Lysosomal-Associated Membrane Protein-2 Antibody with Vasculitis Combined with Hypertension [Pubmed:35356030] |