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载脂蛋白M(APOM)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

ELISA Kit for Apolipoprotein M (APOM)

Apo-M; G3a; NG20; Protein G3a

  • 载脂蛋白M(APOM)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 产品包装(模拟)
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  • 载脂蛋白M(APOM)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 实验结果图
  • SEC299Mu.jpg 标准曲线图
  • Certificate 通过ISO 9001、ISO 13485质量体系认证

特异性

本试剂盒用于检测载脂蛋白M(APOM),经检测与其它相似物质无明显交叉反应。
由于受到技术及样本来源的限制,不可能完成对所有相关或相似物质交叉反应检测,因此本试剂盒有可能与未经检测的其它物质有交叉反应。

回收率

分别于定值血清及血浆样本中加入一定量的载脂蛋白M(APOM)(加标样品),重复测定并计算其均值,回收率为测定值与理论值的比率。

样本 回收率范围(%) 平均回收率(%)
serum(n=5) 86-96 89
EDTA plasma(n=5) 96-104 101
heparin plasma(n=5) 87-94 91

精密度

精密度用样品测定值的变异系数CV表示。CV(%) = SD/mean×100
批内差:取同批次试剂盒对低、中、高值定值样本进行定量检测,每份样本连续测定20 次,分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。
批间差:选取3个不同批次的试剂盒分别对低、中、高值定值样本进行定量测定,每个样本使用同一试剂盒重复测定8次,分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。
批内差: CV<10%
批间差: CV<12%

线性

在定值血清及血浆样本内加入适量的载脂蛋白M(APOM),并倍比稀释成1:2,1:4,1:8,1:16的待测样本,线性范围即为稀释后样本中载脂蛋白M(APOM)含量的测定值与理论值的比率。

样本 1:2 1:4 1:8 1:16
serum(n=5) 85-96% 83-97% 91-105% 97-105%
EDTA plasma(n=5) 91-105% 79-90% 82-97% 83-104%
heparin plasma(n=5) 87-103% 80-94% 94-101% 79-89%

稳定性

经测定,试剂盒在有效期内按推荐温度保存,其活性降低率小于5%。
为减小外部因素对试剂盒破坏前后检测值的影响,实验室的环境条件需尽量保持一致,尤其是实验室内温度、湿度及温育条件。其次由同一实验员来进行操作可减少人为误差。

实验流程

1. 实验前标准品、试剂及样本的准备;
2. 加样(标准品及样本)100µL,37°C孵育1小时;
3. 吸弃,加检测溶液A100µL,37°C孵育1小时;
4. 洗板3次;
5. 加检测溶液B100µL,37°C孵育30分钟;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分钟;
8. 加终止液50µL,立即450nm读数。

实验原理

将载脂蛋白M(APOM)抗体包被于96孔微孔板中,制成固相载体,向微孔中分别加入标准品或标本,其中的载脂蛋白M(APOM)与连接于固相载体上的抗体结合,然后加入生物素化的载脂蛋白M(APOM)抗体,将未结合的生物素化抗体洗净后,加入HRP标记的亲和素,再次彻底洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的载脂蛋白M(APOM)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(O.D.值),计算样品浓度。

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参考文献

杂志 参考文献
Joint Bone Spine Apolipoprotein m (APOM) levels and APOM rs805297 G/T polymorphism are associated with increased risk ofrheumatoid arthritis [Pubmed: 23660425]
Apoptosis The miR-573/apoM/Bcl2A1-dependent signal transduction pathway is essential for hepatocyte apoptosis and hepatocarcinogenesis [PubMed: 26201458]
Lipids in Health and Disease Effects of hyperlipidaemia on plasma apolipoprotein M levels in patients with type 2 diabetes mellitus: an independent case–control study [pubmed:27633510]
Lipids in Health and Disease A single-nucleotide polymorphism C-724 /del in the proter region of the apolipoprotein M gene is associated with type 2 diabetes mellitus [pubmed:27576735]
clinica chimica acta ApoM/HDL-C and apoM/apoA-I ratios are indicators of diabetic nephropathy in healthy controls and type 2 diabetes mellitus. [pubmed:28073663]
International Journal of Clinical and Experimental Pathology Level of serum apolipoprotein m and its diagnostic significance in inflammatory bowel disease [files:ijcep0033416.pdf]
Scandinavian Journal of Medicine & Science in Sports Endurance training selectively increases HDL-bound sphingosine-1-phosphate in the plasma [pubmed:28493600]
INTERNATIONAL JOURNAL OF BIOCHEMISTRY & CELL BIOLOGY HDL-S1P Protects Endothelial Function and Reduces Lung Injury During Sepsis in vivo and in vitro [Pubmed: 32750426]
Biology-Basel Biomechanical Properties of Blood Plasma Extracellular Vesicles Revealed by Atomic Force Microscopy [33374530]
researchsquare Apolipoprotein M in High Density Lipoprotein Protects Against Astrocyte Apoptosis Induced By Ischemic Insult Via Sphingosine 1-Phosphate Signaling []
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