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S100钙结合蛋白A6(S100A6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

ELISA Kit for S100 Calcium Binding Protein A6 (S100A6)

S100-A6; 2A9; 5B10; CABP; CACY; PRA; MLN 4; Calcyclin; Growth factor-inducible protein 2A9; Prolactin receptor-associated protein

  • S100钙结合蛋白A6(S100A6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 产品包装(模拟)
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  • S100钙结合蛋白A6(S100A6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 实验结果图
  • SEB769Mu.jpg 标准曲线图
  • Certificate 通过ISO 9001、ISO 13485质量体系认证

特异性

本试剂盒用于检测S100钙结合蛋白A6(S100A6),经检测与其它相似物质无明显交叉反应。
由于受到技术及样本来源的限制,不可能完成对所有相关或相似物质交叉反应检测,因此本试剂盒有可能与未经检测的其它物质有交叉反应。

回收率

分别于定值血清及血浆样本中加入一定量的S100钙结合蛋白A6(S100A6)(加标样品),重复测定并计算其均值,回收率为测定值与理论值的比率。

样本 回收率范围(%) 平均回收率(%)
serum(n=5) 98-105 101
EDTA plasma(n=5) 78-95 91
heparin plasma(n=5) 86-94 91

精密度

精密度用样品测定值的变异系数CV表示。CV(%) = SD/mean×100
批内差:取同批次试剂盒对低、中、高值定值样本进行定量检测,每份样本连续测定20 次,分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。
批间差:选取3个不同批次的试剂盒分别对低、中、高值定值样本进行定量测定,每个样本使用同一试剂盒重复测定8次,分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。
批内差: CV<10%
批间差: CV<12%

线性

在定值血清及血浆样本内加入适量的S100钙结合蛋白A6(S100A6),并倍比稀释成1:2,1:4,1:8,1:16的待测样本,线性范围即为稀释后样本中S100钙结合蛋白A6(S100A6)含量的测定值与理论值的比率。

样本 1:2 1:4 1:8 1:16
serum(n=5) 91-98% 84-92% 86-97% 94-105%
EDTA plasma(n=5) 90-101% 84-93% 84-104% 95-102%
heparin plasma(n=5) 86-93% 93-101% 86-95% 84-91%

稳定性

经测定,试剂盒在有效期内按推荐温度保存,其活性降低率小于5%。
为减小外部因素对试剂盒破坏前后检测值的影响,实验室的环境条件需尽量保持一致,尤其是实验室内温度、湿度及温育条件。其次由同一实验员来进行操作可减少人为误差。

实验流程

1. 实验前标准品、试剂及样本的准备;
2. 加样(标准品及样本)100µL,37°C孵育1小时;
3. 吸弃,加检测溶液A100µL,37°C孵育1小时;
4. 洗板3次;
5. 加检测溶液B100µL,37°C孵育30分钟;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分钟;
8. 加终止液50µL,立即450nm读数。

实验原理

将S100钙结合蛋白A6(S100A6)抗体包被于96孔微孔板中,制成固相载体,向微孔中分别加入标准品或标本,其中的S100钙结合蛋白A6(S100A6)与连接于固相载体上的抗体结合,然后加入生物素化的S100钙结合蛋白A6(S100A6)抗体,将未结合的生物素化抗体洗净后,加入HRP标记的亲和素,再次彻底洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的S100钙结合蛋白A6(S100A6)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(O.D.值),计算样品浓度。

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参考文献

杂志 参考文献
Journal of Proteomics Tear proteome and protein network analyses reveal a novel pentamarker panel for tear film characterization in dry eye and meibomian gland dysfunction [PubMed: 23201116]
Tumour Biol Diagnostic significance of S100A2 and S100A6 levels in sera of patients with non-small cell lung cancer [PubMed: 26361956]
Clinical and Translational Medicine Serum levels of S100A6 are unaltered in patients with resectable cholangiocarcinoma [pubmed:27709523]
Gastroenterology Tu1938-Micronutrients Assessment in Patients with Cirrhosis [10.1016:S0016-5085(18)33544-3]
Gastroenterology Tu1942-PI3K/AKT-Mediated Upregulation of C7 Inhibits Colorectal Cancer Proliferation and Metastasis [10.1016:S0016-5085(18)33544-5]
Tumor Biology Proteomics detection of S100A6 in tumor tissue interstitial fluid and evaluation of its potential as a biomarker of cholangiocarcinoma [Pubmed:29629840]
scandinavian journal of clinical & laboratory investigation Serum S100A6, S100A8, S100A9 and S100A11 proteins in colorectal neoplasia: results of a single centre prospective study [Pubmed: 31856598]
CELL BIOCHEMISTRY AND FUNCTION S100A6 represses Calu©\6 lung cancer cells growth via inhibiting cell proliferation, migration, invasion and enhancing apoptosis [34008212]
MOLECULAR VISION Quantification of a panel for dry-eye protein biomarkers in tears: A comparative pilot study using standard ELISA and customized microarrays [34012227]
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