25-羟基维生素D3(HVD3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
ELISA Kit for 25-Hydroxyvitamin D3 (HVD3)
25-HVD3; 25HVD3; Calcifediol; Calcidiol; H-VD3; 25-Hydroxycholecalciferol; 25-Hydroxy Vitamin D3; 25(OH)D
- 编号CEA915Ge
- 物种Pan-species (General,通用) 相同的名称,不同的物种。
- 实验方法竞争抑制
- 反应时长2h
- 检测范围6.17-500ng/mL
- 灵敏度最小可检测剂量小于等于2.77ng/mL.
- 样本类型Serum, plasma and other biological fluids
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- 规格 48T96T 96T*5 96T*10 96T*100
- 价格 ¥ 3342 ¥ 4774 ¥ 21481 ¥ 40576 ¥ 334152
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特异性
本试剂盒用于检测25-羟基维生素D3(HVD3),经检测与其它相似物质无明显交叉反应。
由于受到技术及样本来源的限制,不可能完成对所有相关或相似物质交叉反应检测,因此本试剂盒有可能与未经检测的其它物质有交叉反应。
回收率
分别于定值血清及血浆样本中加入一定量的25-羟基维生素D3(HVD3)(加标样品),重复测定并计算其均值,回收率为测定值与理论值的比率。
样本 | 回收率范围(%) | 平均回收率(%) |
serum(n=5) | 99-105 | 102 |
EDTA plasma(n=5) | 78-89 | 85 |
heparin plasma(n=5) | 93-105 | 98 |
精密度
精密度用样品测定值的变异系数CV表示。CV(%) = SD/mean×100
批内差:取同批次试剂盒对低、中、高值定值样本进行定量检测,每份样本连续测定20 次,分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。
批间差:选取3个不同批次的试剂盒分别对低、中、高值定值样本进行定量测定,每个样本使用同一试剂盒重复测定8次,分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。
批内差: CV<10%
批间差: CV<12%
线性
在定值血清及血浆样本内加入适量的25-羟基维生素D3(HVD3),并倍比稀释成1:2,1:4,1:8,1:16的待测样本,线性范围即为稀释后样本中25-羟基维生素D3(HVD3)含量的测定值与理论值的比率。
样本 | 1:2 | 1:4 | 1:8 | 1:16 |
serum(n=5) | 82-91% | 81-104% | 87-99% | 91-101% |
EDTA plasma(n=5) | 80-95% | 83-102% | 79-99% | 97-104% |
heparin plasma(n=5) | 86-104% | 90-97% | 93-105% | 78-98% |
稳定性
经测定,试剂盒在有效期内按推荐温度保存,其活性降低率小于5%。
为减小外部因素对试剂盒破坏前后检测值的影响,实验室的环境条件需尽量保持一致,尤其是实验室内温度、湿度及温育条件。其次由同一实验员来进行操作可减少人为误差。
实验流程
1. 实验前标准品、试剂及样本的准备;
2. 加样(标准品及样本)50µL,
加入50µL检测液A(临用前配制);
37°C温育1小时。
3. 洗板3次;
4. 加检测溶液B100µL,37°C孵育30分钟;
5. 洗板5次;
6. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分钟;
7. 加终止液50µL,立即450nm读数。
实验原理
本试剂盒应用竞争抑制酶联免疫分析法测定标本中待测物质水平。将HVD3单克隆抗体包被微孔板,制成固相载 体,往包被抗体的微孔中同时加入生物素标记的HVD3类似物和待测抗原(标准品或样本),待测抗原与生物素标记HVD3类似物对特异性抗体进行竞争结合。温育后经洗涤去掉未结合物,然后加入HRP标记的亲和素,经过温育和彻底洗涤后加入底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。待测标本浓度越高,标记抗原和抗体的结合就越受到抑制,显色愈浅。显色的深浅与酶量呈正相关,而与样品中待测物质含量呈负相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(O.D.值),计算样品浓度。
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参考文献
杂志 | 参考文献 |
Allergy & Clinical Immunology | Decreased serum LL-37 and vitamin D3 levels in atopic dermatitis: relationship between IL-31 and oncostatin M [Wiley: source] |
Tianjin Med J | 成人哮喘血清维生素D 水平与肺功能相关因素分析 [Jwk_Tjyy: Cn] |
Journal of Functional Foods | Comparative effects of brown and golden flaxseeds on body composition, inflammation and bone remodelling biomarkers in perimenopausal overweight women [S1756464617301561] |
J Nutr Biochem. | Chronic maternal calcium and 25-hydroxyvitamin D deficiency in Wistar rats programs abnormal hepatic gene expression leading to hepatic steatosis in female offspring. [pubmed:28219837] |
in vivo | Effect of Calcitriol on FGF23 Level in Healthy Adults and its Dependence on Phosphate Level [pubmed:28064234] |
Asia pacific allergy | Serum 25-hydroxyvitamin D inversely associated with blood eosinophils in patients with persistent allergic rhinitis. [pubmed:29094019] |
Biomed Research International | Effects of Vitamin D Restricted Diet Administered during Perinatal and Postnatal Periods on the Penis of Wistar Rats [Pubmed:29850540] |
Clin Implant Dent Relat Res. | Evaluation of FGF‐23 and 25(OH)D3 levels in peri‐implant sulcus fluid in peri‐implant health and diseases [Pubmed: 31407857] |
JOURNAL OF STEROID BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY | Circulating Osteocyte‐Related Biomarkers (vitamin D, sclerostin, dickkopf-1), hepcidin, and oxidative stress markers in early breast cancer: their impact in … [Pubmed: 33065276] |
The Journal of Obstetrics and Gynecology of India | The Effects of Follicular Fluid 25 (OH) D Concentration on Intrafollicular Estradiol Level, Oocyte Quality, and Fertilization Rate in Women Who Underwent IVF Program [] |